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如何進行MRM/PRM定量蛋白組學(xué)分析?2025/7/1
MRM(MultipleReactionMonitoring,多反應(yīng)監(jiān)測)和PRM(ParallelReactionMonitoring,平行反應(yīng)監(jiān)測)是兩種靶向定量蛋白質(zhì)組學(xué)的技術(shù)路線。以下是進行M...
蛋白質(zhì)組定量中的LFQ與同位素標(biāo)記策略2025/6/24
定量蛋白質(zhì)組學(xué)在當(dāng)代生命科學(xué)研究中扮演著關(guān)鍵角色,幫助研究人員深入了解生理或病理狀態(tài)下細胞系統(tǒng)的動態(tài)調(diào)控機制。不同于僅關(guān)注蛋白種類的“鑒定”,蛋白質(zhì)定量的核心在于測量蛋白豐度的變化,從而揭示差異表達、...
蛋白質(zhì)測序 Q&A2025/6/24
Q1:蛋白質(zhì)測序需要保持蛋白活性嗎?A1:不需要。蛋白質(zhì)測序關(guān)注的是氨基酸序列信息,而非蛋白的生物學(xué)功能。因此,無論采用Edman降解法還是質(zhì)譜法,測序過程中蛋白是否具有活性都不會影響序列結(jié)果。實際上...
Pull-down靶蛋白質(zhì)譜鑒定的原理2025/6/11
Pull-down靶蛋白質(zhì)譜鑒定是一種基于親和純化-質(zhì)譜聯(lián)用的技術(shù),主要用于研究蛋白質(zhì)相互作用(如蛋白-蛋白、蛋白-小分子、蛋白-核酸等)。其核心原理是通過特異性標(biāo)簽捕獲“誘餌”分子,分離與其直接或間...
泛素化定量蛋白組學(xué)研究的具體步驟2025/6/4
泛素化定量蛋白組學(xué)研究旨在系統(tǒng)性分析蛋白質(zhì)翻譯后修飾(泛素化)的動態(tài)變化,其核心步驟包括樣品制備、泛素化肽段富集、質(zhì)譜檢測、定量分析與生物信息學(xué)驗證。以下是詳細技術(shù)流程及關(guān)鍵要點:一、實驗設(shè)計階段樣本...
蛋白質(zhì)相互作用質(zhì)譜分析2025/5/31
蛋白質(zhì)相互作用質(zhì)譜分析是研究蛋白質(zhì)間相互作用網(wǎng)絡(luò)的重要技術(shù),廣泛應(yīng)用于疾病機制、信號通路解析和藥物靶點發(fā)現(xiàn)等領(lǐng)域。以下是其核心內(nèi)容和關(guān)鍵步驟的整理:1.基本原理目標(biāo):通過質(zhì)譜技術(shù)鑒定與目標(biāo)蛋白(bai...
翻譯后修飾的全面分析2025/5/28
在生命活動中,蛋白質(zhì)翻譯后修飾(PTMs)是調(diào)控蛋白功能、穩(wěn)定性、定位及相互作用的關(guān)鍵機制,廣泛參與細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、代謝調(diào)控、免疫應(yīng)答、細胞周期與疾病發(fā)生發(fā)展等多個生命活動環(huán)節(jié)。隨著組學(xué)技術(shù)的發(fā)展,研究...
蛋白質(zhì)翻譯后修飾概覽2025/5/28
盡管蛋白質(zhì)組學(xué)已為我們提供了細胞中蛋白表達的全景圖譜,但僅有蛋白表達量信息,遠不足以解釋生命系統(tǒng)的動態(tài)調(diào)控行為。蛋白質(zhì)的功能狀態(tài),并不簡單由其表達水平所決定,而是高度依賴于翻譯后所發(fā)生的共價修飾事件,...
蛋白質(zhì)乳酸化:原理、機制與檢測2025/5/28
蛋白質(zhì)乳酸化的發(fā)現(xiàn)長期以來,乳酸(lactate)被視為細胞代謝中的“廢棄物”。在經(jīng)典代謝路徑中,細胞在缺氧或高強度代謝狀態(tài)下會啟動糖酵解,快速將葡萄糖轉(zhuǎn)化為丙酮酸。由于缺乏氧氣,丙酮酸無法進入線粒體...
埃德曼降解測序的原理、優(yōu)勢和不足2025/5/27
埃德曼測序的原理埃德曼降解法測序(Edmandegradationsequencing)誕生于二十世紀(jì)五十年代,是由瑞典化學(xué)家PehrEdman提出并不斷完善的一種經(jīng)典蛋白質(zhì)N端序列分析技術(shù)。該方法利...
蛋白質(zhì)組學(xué)分析的主要內(nèi)容和方法2025/5/27
蛋白質(zhì)組學(xué)分析的主要內(nèi)容和方法蛋白質(zhì)組學(xué)(Proteomics)是研究生物體內(nèi)所有蛋白質(zhì)的組成、結(jié)構(gòu)、功能及其動態(tài)變化的學(xué)科,其核心目標(biāo)是從整體層面解析蛋白質(zhì)的表達、修飾、相互作用及調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。以下是蛋...
蛋白質(zhì)糖基化分析Q&A2025/5/21
Q1:蛋白質(zhì)糖基化分析的常用方法有哪些?A1:核心方法包括:1、色譜分析(Chromatography)色譜法可根據(jù)糖鏈或糖蛋白的理化特性進行有效分離。在糖基化分析中,常用的液相色譜技術(shù)(如HILIC...
磷酸化Q&A2025/5/20
Q1:如何選擇磷酸化位點檢測的最佳方法?A1:常規(guī)檢測推薦Westernblot(WB),適用于已知位點的快速驗證。若需高通量檢測或未知位點鑒定,質(zhì)譜法(如TiO2富集結(jié)合LC-MS/MS)是shǒu...
布帕伐酮通過與病毒糖蛋白Gc相互作用抑制發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒感染2025/4/30
背景介紹:SevereFeverwithThrombocytopeniaSyndromeVirus(SFTSV)發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒,屬于布尼亞病毒科(Bunyavirales)的白蛉病毒屬(B...
格列本脲通過代謝調(diào)節(jié)的表觀遺傳修飾靶向MDH2來緩解衰老表型2025/4/30
研究背景:抗衰老藥物開發(fā)的一個主要挑戰(zhàn)是有效靶點的確定。表觀遺傳失調(diào)已成為衰老的關(guān)鍵標(biāo)志和驅(qū)動力,這表明改善這種失調(diào)可能是緩解衰老表型的一種有希望的策略。據(jù)報道,補充代謝物,包括NAD+前體,α-酮戊...

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