5
當(dāng)前位置：武漢原生原代生物醫(yī)藥科技有限公司>>技術(shù)文章>>PriCells: 正常兔食管上皮細(xì)胞培養(yǎng)
PriCells: 正常兔食管上皮細(xì)胞培養(yǎng)
PriCells: 正常兔食管上皮細(xì)胞培養(yǎng)
實(shí)驗(yàn)材料：
1. 大兔的正常食管組織
2. 6孔培養(yǎng)板：用多聚賴氨酸4℃包被過夜
3. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素和200000U/L慶大霉素，pH7.4
4. 手術(shù)刀、解剖剪、解剖鑷、眼科剪，眼科鑷
實(shí)驗(yàn)方法：
1. 處死大兔，取正常食管組織放入含雙抗的PBS（pH=7.2）中反復(fù)清洗3次，以洗去組織表面的血絲及粘液；
2. 小心的用眼科剪鑷將食管黏膜與黏膜下組織分離；
3. 分離出的粘膜組織用含雙抗的PBS（pH=7.2）反復(fù)沖洗若干次；
4. 將清洗后食管黏膜組織剪成1mm3左右大小的組織塊；
5. 再次用含雙抗的PBS（pH=7.2）反復(fù)清洗，直至清洗液清亮為止；
6. 將黏膜組織塊按1塊/cm2的密度接種于6孔培養(yǎng)板中，上皮面朝下；
7. 將貼滿組織塊的培養(yǎng)板室溫放置5~10分鐘，待組織塊貼壁后，轉(zhuǎn)入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
8. 靜置2h左右，待組織塊基本不會浮起后，加入0.5-1ml培養(yǎng)液，置于37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。3-4天后有上皮細(xì)胞從組織邊緣爬出，7天左右鋪滿板面。
PriCells提供：
1. 各種原代細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基；
2. 各種原代細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑；
3. 原代細(xì)胞分離試劑盒；
4. 原代細(xì)胞鑒定試劑盒；
5. 各種原代細(xì)胞DNA；
6. 各種原代細(xì)胞RNA；
7. 各種原代細(xì)胞蛋白質(zhì)；