化工儀器網(wǎng)
技術(shù)文章
內(nèi)酰胺酶大腸桿菌（大腸埃希氏菌）LAMP試劑盒使用方法
閱讀：1321 發(fā)布時間：2022-5-18RT-超廣譜RT-內(nèi)酰胺酶大腸桿菌（大腸埃希氏菌）LAMP試劑盒使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。
1. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品，則需要進行 N+2 個樣品提取，多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù)，則標記 N+9 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），6 個用于標準曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復(fù)，則標記 N+4 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），1 個用于PCR 陽性對照。
柱式水樣DNAout
柱式土壤DNAout
柱式微生物基因組DNAout
柱式細菌DNAout（50次）
病毒DNA提取
96孔板病毒DNAout(離心法)（1次）
96孔板病毒DNAout(離心法)（5次）
96孔板病毒DNAout(真空法)（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）
M13噬菌體單鏈基因組DNAout（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）
λ噬菌體DNAout（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）
一管式病毒DNA-RNAout
一管式病毒DNAout（200次）
一管式病毒DNAout（50次）
柱式病毒DNAout
經(jīng)典法質(zhì)粒DNA提取
96孔板質(zhì)粒DNAout(離心法)
96孔板質(zhì)粒DNAout(真空法)（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）
大提無內(nèi)毒素質(zhì)粒DNAout
大提無內(nèi)毒素質(zhì)粒DNAout
大提柱式Ti質(zhì)粒DNAout（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）
大提柱式質(zhì)粒DNAout
革氏陽性細菌質(zhì)粒DNAout
中提柱式BAC DNAout
柱式BAC DNAout
柱式Ti質(zhì)粒DNAout（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）
柱式酵母質(zhì)粒DNAout
柱式無內(nèi)毒素質(zhì)粒DNAout
柱式質(zhì)粒DNAout(50次)
一步法質(zhì)粒DNA提取
一步法96孔板單菌落質(zhì)粒DNAout（離心法）（停產(chǎn)）
一步法96孔板單菌落質(zhì)粒DNAout（離心法）（停產(chǎn)）
一步法96孔板單菌落質(zhì)粒DNAout（真空法）（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）
一步法96孔板質(zhì)粒DNAout（離心法）
一步法96孔板質(zhì)粒DNAout（真空法）（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）
一步法大提質(zhì)粒DNAout