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今天小編或?qū)槟憬忾_PCR反應(yīng)體系中，熒光染料法
閱讀：1876 發(fā)布時間：2020-5-28PCR的時候，你是否還在費心的準(zhǔn)備冰盒，是否還在擔(dān)憂會否因為室溫太高導(dǎo)致酶活降低甚至失效，今天小編或?qū)槟憬忾_這些煩憂。
在傳統(tǒng)PCR反應(yīng)體系中，加入過量熒光染料，該染料只與雙鏈DNA小溝結(jié)合的染料，并不與單鏈DNA鏈結(jié)合，而且在游離狀態(tài)不發(fā)出熒光，只有摻入DNA雙鏈中才可以發(fā)光，因此，在PCR體系中，隨著特異性PCR產(chǎn)物的指數(shù)擴增，每個循環(huán)的延伸階段，染料摻入雙鏈DNA中，其熒光信號強度與PCR產(chǎn)物的數(shù)量呈正相關(guān)。下圖以SYBR Green I染料為例：
反轉(zhuǎn)錄PCR（Reverse TranscriptionPCR, RT-PCR）
RT-PCR是一種將cDNA合成與PCR技術(shù)結(jié)合分析基因表達的快速靈敏的方法，主要用于對表達信息進行檢測或定量分析。在實際應(yīng)用中，RT—PCR又常常分為一步法RT-PCR和兩步法RT-PCR。