HSF95 Insect Cell Medium 昆蟲培養(yǎng)基 CW003（2025 版）產(chǎn)品介紹

一、產(chǎn)品概述

CW003 昆蟲培養(yǎng)基專為 sf9、High Five 等昆蟲細胞的懸浮培養(yǎng)和瞬時表達設計，內(nèi)含細胞生長所需的全部營養(yǎng)成分，無需額外添加其他物質(zhì)即可直接使用，極大簡化了實驗操作流程。

二、核心優(yōu)勢

1. 無血清配方：有效避免血清批次差異、外源因子污染等問題，為細胞培養(yǎng)提供更穩(wěn)定的環(huán)境。

2.   即用型設計：開箱即可使用，無需進行復雜的成分添加和調(diào)配，節(jié)省實驗準備時間。

3.   高效培養(yǎng)：支持 sf9、High Five 等昆蟲細胞的懸浮培養(yǎng)馴化與高密度培養(yǎng)，顯著提升細胞培養(yǎng)效率。

4.   基因表達支持：與桿狀病毒載體表達系統(tǒng)高度適配，可高效生產(chǎn)重組基因蛋白，為科研與生產(chǎn)提供可靠保障。

三、基礎參數(shù)

（此處待補充具體基礎參數(shù)內(nèi)容）

四、使用方法

（一）細胞馴化與傳代

1. 培養(yǎng)條件：溫度設定為 27℃，搖床轉(zhuǎn)速保持在 110 - 130 rpm；傳代時，細胞密度需控制在 0.8 -      1.2×10? cells/mL，以維持細胞的良好生長狀態(tài)。

2.   直接馴化：在多數(shù)情況下，使用其他培養(yǎng)基培養(yǎng)的 sf9、High Five 細胞，可直接通過日常傳代稀釋的方式更換至 CW003 培養(yǎng)基，細胞能夠自然適應新的培養(yǎng)環(huán)境。

3.   漸進式馴化

• 操作要點：選擇低代次且處于對數(shù)生長期的細胞進行馴化。

• 具體步驟：首先在原培養(yǎng)基中復蘇細胞，并使用原培養(yǎng)基連續(xù)傳代 2 - 3 次，直至細胞生長穩(wěn)定。隨后，采用原培養(yǎng)基與 CW003 培養(yǎng)基混合的方式逐步馴化（CW003 比例從 25% 逐步遞增至 90%），傳代細胞密度控制在 0.8 - 1.1×10? cells/mL，每 48 小時傳代一次。當細胞在含 90% 以上 CW003 培養(yǎng)基中生長狀態(tài)良好后，可嘗試將細胞傳代至 100% CW003 培養(yǎng)基，并連續(xù)傳代 3 - 4 次。若細胞仍能保持穩(wěn)定生長，即表明細胞已成功適應 CW003 培養(yǎng)基。

（二）細胞復蘇

1. 從凍存設備中迅速取出細胞，在 37℃水浴環(huán)境下快速解凍，解凍過程中可輕輕晃動凍存管，確保解凍均勻，整個過程需控制在 120 秒以內(nèi)，當凍存管內(nèi)僅剩余小塊冰晶時停止。

2.   在生物安全柜內(nèi)，將融化后的細胞全部轉(zhuǎn)移至無菌離心管中，加入 10 mL 預熱至 37℃的培養(yǎng)基，以 175 g 的離心力離心 5 分鐘，棄去上清液，再加入 20 - 30mL 預熱至 37℃的新鮮培養(yǎng)基重懸細胞，最后轉(zhuǎn)移至搖瓶中進行培養(yǎng)。

（三）細胞凍存

1. 凍存細胞應選擇處于對數(shù)生長期、狀態(tài)良好且活力≥98% 的細胞，以保證凍存后細胞的復蘇成功率。

2.   提前計算所需凍存的細胞管數(shù)和培養(yǎng)基體積，凍存密度推薦為 2.5 - 3.5×10? cells/ml/ 支（常規(guī)凍存濃度為 1.0 - 2.0×10? cells/ml/ 支）。

3.   凍存液配制：將 45% 新鮮培養(yǎng)基、45% 原培養(yǎng)基（上清）和 10% DMSO 充分混合均勻，配制好的凍存液存放于 4℃環(huán)境，建議當天配制當天使用。

4.   以 175 g 離心力離心 5 分鐘收集細胞，棄去上清液，使用 4℃預冷的凍存培養(yǎng)基重懸細胞。

5.   將重懸后的細胞液迅速分裝至無菌凍存管中，每管 1ml，并做好清晰的標簽標記。

6.   將細胞凍存管放入填充有異丙醇并經(jīng) 4℃預冷的程序降溫凍存盒中，置于 - 80℃冰箱（降溫速率為每分鐘下降 1℃）過夜，次日將細胞轉(zhuǎn)入液氮罐中長期保存。

上述潤色使產(chǎn)品介紹更專業(yè)規(guī)范。若你覺得某些部分還需調(diào)整，或想補充更多信息，歡迎隨時告訴我。