安捷倫科技（中國）有限公司
使用高效液相色譜熒光檢測法測定食品中的低聚半乳糖
檢測樣品：嬰幼兒配方乳粉
檢測項目：低聚半乳糖
方案概述：本文參照《食品安全國家標準 食品中低聚半乳糖的測定》(GB 5009.289-2023)，建立了一種測定食品中低聚半乳糖的高效液相色譜方法。該方法使用 UHPLC-FLD 檢測器與Agielnt AdvanceBio 糖譜分析色譜柱 (4.6 × 150 mm, 2.7 μm)，檢測食品中的低聚半乳糖含量。
低聚半乳糖 (GOS) 是一種天然存在的功能性低聚糖。動物乳汁中含有微量 GOS；人乳中的 GOS 含量較高，且嬰兒體內(nèi)雙歧桿菌菌群的建立在很大程度上依賴母乳中的 GOS 成分。GOS 是一種重要的益生元，能夠選擇性地促進人體腸道內(nèi)固有的雙歧桿菌等有益菌的增殖，從而發(fā)揮諸多生理功能，包括：抑制腸道內(nèi)腐敗菌的生長，減少有害代謝產(chǎn)物的形成，預(yù)防腸癌的發(fā)生，防止便秘，降低血清膽固醇含量，促進礦物元素吸收，預(yù)防齲齒，增加機體免疫力，以及改善脂質(zhì)代謝等。目前，GOS 作為一種新型功能食品添加劑，在食品加工業(yè)中的應(yīng)用非常廣泛。
低聚半乳糖分子結(jié)構(gòu)一般是在半乳糖或葡萄糖分子上連接有 1–7 個半乳糖基，即 Gal-(Gal)n-Glc/Gal（其中 n 為 0–6）。工業(yè)用低聚半乳糖多以乳糖或乳清為原料，通過 β-半乳糖苷酶的轉(zhuǎn)糖苷作用制得。不同的 β-半乳糖苷酶和生產(chǎn)工藝影響產(chǎn)品中低聚糖的結(jié)構(gòu)和比例。目前，從低聚半乳糖中分離出且結(jié)構(gòu)得到確定的組分已達 17 種。
現(xiàn)有文獻報道的檢測方法大多基于 AOAC 2001.02 方法。采用β-半乳糖苷酶使樣品中的 GOS 和乳糖水解，然后計算水解前后由GOS 產(chǎn)生的半乳糖含量的變化和轉(zhuǎn)化系數(shù)，從而得到樣品中 GOS 的含量。但由于樣品中乳糖同樣被酶水解產(chǎn)生半乳糖，因此使半乳糖含量變化的計算結(jié)果產(chǎn)生誤差。同時，該方法也未給出轉(zhuǎn)化系數(shù)計算方法，因此不能夠解決高乳糖含量對食品中 GOS 測定的影響。本文參照 GB 5009.289-2023，建立了一種在 GOS 標記后測定食品中的 GOS 含量的方法。該方法采用高分辨質(zhì)譜或三重四極桿質(zhì)譜，對不同聚合度的 GOS 保留時間段進行輔助判定。
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