三種常見蛋白質結構分析方法的優(yōu)缺點對比檢測技術服務詳情介紹

dànbáizhì作為生命活動的核心執(zhí)行者，其三維結構直接決定了其功能。jīngzhǔn解析dànbáizhì結構不僅有助于揭示生物學機制，還為新藥研發(fā)、疾病機理研究提供重要線索。當前，dànbáizhì結構解析技術主要包括X射線晶體學、核磁共振（NMR）光譜和冷凍電鏡（Cryo-EM）。

一、X射線晶體學：高分辨率結構解析的“金標準”

X射線晶體學通過分析dànbáizhì晶體對X射線的衍射圖樣，推導出其原子級別的三維結構。其優(yōu)勢主要體現在分辨率高（可達1.0?以下），適用于大量樣品的高通量解析。目前，全球dànbáizhì數據庫（PDB）中約80%的結構均由該方法獲得。

?優(yōu)點：

• 超高分辨率：能清晰揭示dànbáizhì中氨基酸側鏈、金屬離子及水分子的精細排列。

• 成熟的技術體系：實驗方案和數據處理軟件（如Phenix, CCP4）相對成熟完善。

• 適用范圍廣泛：適合大部分可結晶的dànbáizhì，包括酶、受體、抗體等。

??缺點：

• 結晶難度高：許多dànbáizhì難以結晶，尤其是膜蛋白和柔性區(qū)域豐富的蛋白。

• 靜態(tài)結構：晶體環(huán)境可能限制蛋白的天然構象和動力學特征。

• 制備耗時：從結晶篩選到數據解析，往往需要數周到數月時間。

二、核磁共振（NMR）光譜：揭示溶液態(tài)dànbáizhì結構與動力學

NMR依賴于溶液中核自旋的共振信號，通過分析一系列多維譜圖，重建dànbáizhì結構。它對dànbáizhì的柔性結構和動力學研究尤為重要。

?優(yōu)點：

• 近自然狀態(tài)解析：NMR在近生理條件下提供dànbáizhì結構信息，更接近其在細胞內的真實狀態(tài)。

• 捕捉動態(tài)特性：不僅揭示靜態(tài)結構，還能解析dànbáizhì構象變化和動力學。

• 無需結晶：對難結晶蛋白（如某些膜蛋白的胞內區(qū)）尤其適用。

??缺點：

• 分子量限制：適合研究小于50kDa的dànbáizhì，對于較大復合物解析難度大。

• 信號復雜重疊：樣品濃度、純度要求高，且信號分析復雜，需要豐富經驗。

• 分辨率相對較低：難以達到X射線晶體學的原子級分辨率。

三、冷凍電鏡（Cryo-EM）：大型復合物和動態(tài)結構研究的利器

Cryo-EM通過快速冷凍樣品，利用低溫電子束成像并重構三維密度圖，適用于解析大分子復合物結構。近年來，隨著單粒子成像技術和分辨率提升（達2?左右），Cryo-EM已成為結構生物學的熱門技術。

?優(yōu)點：

• 無需結晶：適合研究難以結晶的大型復合物，如病毒顆粒、核糖體及膜蛋白復合物。

• 大分子適用：可處理上百萬道爾頓的超大復合物。

• 多構象解析：可捕捉同一體系中不同構象態(tài)，揭示功能相關的動態(tài)變化。

• 分辨率顯著提升：近年來冷凍電鏡技術的“分辨率革命”使其解析能力接近X射線晶體學。

??缺點：

• 樣品制備挑戰(zhàn)：需要高純度、均一分散的樣品，且樣品制備和冰層厚度控制技術要求高。

• 設備昂貴：gāoduān冷凍電鏡（如Titan Krios）及其維護成本jígāo。

• 數據處理復雜：圖像對齊、三維重構及異構性分類均需強大計算力與算法支持。

四、三種方法的對比與綜合應用

在實際應用中，這三種技術并非互斥，而是互為補充。X射線晶體學適用于獲取高分辨率的靜態(tài)結構，NMR則揭示溶液態(tài)構象與動態(tài)信息，而Cryo-EM在大分子復合物和多構象研究中展現出dútè優(yōu)勢?？蒲腥藛T常采用多技術聯(lián)合策略：例如，通過Cryo-EM解析膜蛋白復合物整體結構，再利用X射線晶體學獲得其高分辨率結構域，zuì后借助NMR解析柔性區(qū)動態(tài)特征。

從解析精度、適用范圍到實驗條件，X射線晶體學、NMR光譜法和Cryo-EM各具優(yōu)勢與局限?？蒲腥藛T在選擇技術手段時，應結合目標蛋白的分子特性（如分子量、柔性程度、結晶能力）、研究需求（高分辨率靜態(tài)結構、動態(tài)構象、復合體解析）以及實驗資源（設備條件、時間成本）等因素綜合考慮。百泰派克生物科技提供高質量的dànbáizhì結構鑒定服務，助力科研人員全面揭示dànbáizhì的結構與功能聯(lián)系，從而加速科學突破和創(chuàng)新發(fā)現。

百泰派克生物科技特色項目

一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對dànbáizhì序列進行分析，提供基于質譜的蛋白測序分析服務，包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務。對于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務，對蛋白序列進行分析。

※服務優(yōu)勢：

1.采用目前世界上先進的質譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質譜平臺結合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學、靶向dànbáizhì組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種dànbáizhì組學分析服務。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學服務，助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫(yī)學及高通量修飾組學等研究工作。

※服務優(yōu)勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析，發(fā)現新的生物標記物;

2.體內體外多種dànbáizhì標記方法，適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;

3.質譜分析靈敏度高，實驗結果重復度高;

4.可檢測較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學分析，分析更系統(tǒng)準確。

三、單細胞質譜流式技術分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質譜流式系統(tǒng)進行單細胞質譜流式技術分析，采用金屬元素標記物（通常是金屬元素標記的特異抗體）標記細胞表面和內部的分子，然后用流式細胞原理分離單個細胞，再用電感耦合等離子體質譜（ICP-MS）分析單個細胞的原子質量譜，zuì后將原子質量譜數據轉換為細胞表面和內部的信號分子表達量。

※服務優(yōu)勢：

1.技術先進，填補技術空白

采用金屬標記抗體技術，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細胞層面上對多種指標同時進行表征，百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。

2.分析數量大，成本較低

單細胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細胞匯總的分析數目一般在2x10^4個左右，而流式質譜技術一次（單樣本）就可分析至少10^5的細胞，實現了數量級的提高，且成本不高于單細胞RNAseq。

3.應用前景大

①流式質譜結果可以給出細胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標簽技術與其他技術結合會有新應用方向。除常規(guī)蛋白外，質譜流式細胞技術還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現

百泰派克生物科技的基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析，可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質譜技術，MALDI TOF，高效色譜分離技術，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結構分析，到產品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質生物藥物分析服務，幫助生物醫(yī)藥生產商提高生物藥物品質。

百泰派克生物科技七大檢測平臺

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質譜多組學優(yōu)質服務商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導原則，通過CNAS/ISO9001雙重質量體系認證，建立了完備的質量體系，數據冷熱/異地備份，設備定期計量/期間核查，軟件審計追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術服務，支持新藥研發(fā)、藥物申報注冊和生產放行。

1.公司采用ISO9001質量控制體系，zhuānyè提供以質譜為基礎的CRO檢測分析服務；

2.獲國家CNAS實驗室認可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質量研究服務；

3.業(yè)務范圍覆蓋dànbáizhì組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質譜流式、生信云分析以及多組學生物質譜整合分析等；

4.七大質量控制檢測平臺，滿足您一站式服務需求；

5.服務3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質的生物質譜分析服務!

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