概述

2025年版《中國藥典》將于10月1日起正式實(shí)施，在生物制品質(zhì)量控制及病毒安全性評(píng)價(jià)方面做出了關(guān)鍵修訂，對(duì)推動(dòng)生物醫(yī)藥行業(yè)發(fā)展十分重要。

在《2025年版中國藥典《生物制品生產(chǎn)用動(dòng)物細(xì)胞基質(zhì)制備及質(zhì)量控制》變化及解讀（一）》文章中，我們對(duì)細(xì)胞檢定總體變化、項(xiàng)目及方法的變化進(jìn)行了解讀。

接下來我們將聚焦2025年版藥典中“細(xì)胞內(nèi)外源病毒因子檢查”部分的變化，解讀病毒因子檢查總述、體外培養(yǎng)法、動(dòng)物體內(nèi)接種法以及牛源、豬源和其他特定病毒檢測(cè)方面的更改或新增內(nèi)容。

注：以下內(nèi)容中，“XXXX”表示刪除內(nèi)容，綠色字體表示更改內(nèi)容，紅色字體為新增內(nèi)容。

01細(xì)胞內(nèi)外源病毒因子總述變化與解讀

生物制品以細(xì)胞、動(dòng)物或人源組織和體液為起始原材料，存在病毒污染的風(fēng)險(xiǎn)，因此國內(nèi)外監(jiān)管機(jī)構(gòu)都對(duì)生物制品的病毒安全性控制進(jìn)行了要求和規(guī)定。病毒因子污染可能來自原細(xì)胞系（細(xì)胞基質(zhì)）本身，也可能是生產(chǎn)過程中帶入的外源病毒，都有可能在臨床上產(chǎn)生嚴(yán)重的副作用。

在2025年版藥典變化與解讀（一）中，我們對(duì)細(xì)胞庫檢定的基本要求進(jìn)行了分享，接下來我們一起看看“細(xì)胞內(nèi)、外源病毒因子檢查”有哪些變化吧！

02體外培養(yǎng)法檢測(cè)變化與解讀

該檢項(xiàng)為保持與國際接軌，進(jìn)行了多處修改：

1. 刪除指示細(xì)胞“同組織類型”的要求

2. 增加昆蟲細(xì)胞樣本檢測(cè)用指示細(xì)胞的特殊要求

3. 刪除接種量與細(xì)胞傳代培養(yǎng)的細(xì)節(jié)描述

4. 指示細(xì)胞培養(yǎng)天數(shù)由14天修訂為28天

5. 規(guī)定了新鮮紅細(xì)胞的暫存條件和配置要求

6. 進(jìn)行血吸附試驗(yàn)和血凝集試驗(yàn)時(shí)既可以使用混合的豚鼠紅細(xì)胞和雞紅細(xì)胞進(jìn)行也可使用單一紅細(xì)胞分別檢測(cè)

7. 對(duì)于只有使用懸浮或半懸浮指示細(xì)胞檢測(cè)時(shí)，可以僅進(jìn)行紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)，而不再硬性要求做血吸附試驗(yàn)

8. 因所有指示細(xì)胞均培養(yǎng)28天，故刪除人二倍體細(xì)胞培養(yǎng)28天的經(jīng)驗(yàn)描述

03逆轉(zhuǎn)錄病毒檢測(cè)變化與解讀

逆轉(zhuǎn)錄病毒（Retrovirus）屬于具有單鏈RNA基因組的包膜病毒，通過逆轉(zhuǎn)錄酶將RNA基因組轉(zhuǎn)化為雙鏈DNA，并整合至宿主細(xì)胞染色體中。逆轉(zhuǎn)錄病毒具有高效整合能力和廣泛的宿主細(xì)胞適應(yīng)性，在基因治療、細(xì)胞工程及基礎(chǔ)研究領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。

同時(shí)，小鼠或其它嚙齒類動(dòng)物來源的細(xì)胞系含有逆轉(zhuǎn)錄病毒序列，可能具有感染性。因此，逆轉(zhuǎn)錄病毒是細(xì)胞內(nèi)、外源病毒因子檢查中的重要一環(huán)。2025年版藥典對(duì)這類檢項(xiàng)進(jìn)行了多處修改，比如：

①與國際要求一致，在逆轉(zhuǎn)錄病毒項(xiàng)下增加“化學(xué)誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)”。

②已有豐富先驗(yàn)知識(shí)的細(xì)胞系，如CHO、NS0、Sp2/0、Vero 等，不需要進(jìn)行化學(xué)誘導(dǎo)試驗(yàn)

③對(duì)于昆蟲細(xì)胞系，雖不用再進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄酶活性測(cè)定，但需要進(jìn)行化學(xué)誘導(dǎo)試驗(yàn)以評(píng)估細(xì)胞中是否存在未知的可被誘導(dǎo)的內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒。參考國外發(fā)表的文獻(xiàn)，如使用IDU進(jìn)行誘導(dǎo)后進(jìn)行電鏡觀察或感染性試驗(yàn)

④對(duì)于昆蟲細(xì)胞系，主要是諾達(dá)病毒、彈狀病毒等問題；而PBMC或CAR-T等人源細(xì)胞的潛在DNA皰疹病毒也需要研究檢測(cè)

04新增分子生物學(xué)檢測(cè)法

與國際要求一致，在“細(xì)胞內(nèi)、外源病毒因子檢查”項(xiàng)下增加分子生物學(xué)方法。與ICH Q5A R2接軌，可以接受經(jīng)驗(yàn)證的NGS法替代動(dòng)物體內(nèi)接種法檢測(cè)外源病毒，但目前NGS法檢測(cè)外源病毒還未有標(biāo)準(zhǔn)化方法，有出現(xiàn)假陽性的可能，目前國際相關(guān)法規(guī)和文獻(xiàn)對(duì)NGS方法學(xué)開發(fā)和驗(yàn)證提出了建議和要求。

義翹神州已完成“2025年版《中國藥典》變化及解讀”的PDF版，主要涉及“生物制品生產(chǎn)用動(dòng)物細(xì)胞基質(zhì)制備及質(zhì)量控制（通則0234）”和“生物制品檢定用動(dòng)物細(xì)胞質(zhì)量控制（通則0235）”兩部分。

05義翹神州生物安全檢測(cè)平臺(tái)

義翹神州在北京和蘇州設(shè)有雙檢測(cè)中心（4200m2），并建立了生物安全二級(jí)負(fù)壓實(shí)驗(yàn)室。實(shí)驗(yàn)室已在北京、蘇州完成備案，并通過CMA和CNAS認(rèn)證，嚴(yán)格按照GMP、GLP和CANS規(guī)范進(jìn)行設(shè)計(jì)與管理。義翹神州的檢測(cè)團(tuán)隊(duì)具備扎實(shí)的生物醫(yī)學(xué)、藥學(xué)等相關(guān)專業(yè)背景，具有豐富的經(jīng)驗(yàn)和專業(yè)的技術(shù)能力，深刻了解并能夠隨時(shí)跟蹤中外（如NMPA、FDA、ICH、EMA等）最-新法規(guī)及要求，可全程提供技術(shù)指導(dǎo)，并在項(xiàng)目開展之前提供相關(guān)咨詢。 

義翹神州提供病毒清除驗(yàn)證和細(xì)胞庫檢測(cè)方案，為企業(yè)藥品申報(bào)保駕護(hù)航，助力客戶順利完成IND和BLA的國內(nèi)外申報(bào)工作。截止目前，已成功完成5000+樣品的細(xì)胞庫檢測(cè)及5000多次病毒清除驗(yàn)證研究，涉及的產(chǎn)品類型有抗體、蛋白、疫苗等。協(xié)助客戶完成近300+項(xiàng)目申報(bào)，申報(bào)成功率高。

免責(zé)聲明：義翹神州內(nèi)容團(tuán)隊(duì)僅是分享和解讀公開的研究論文及其發(fā)現(xiàn)，專注于介紹生物醫(yī)藥研究新進(jìn)展。本文僅作信息交流用，文中觀點(diǎn)不代表義翹神州立場(chǎng)。隨著對(duì)疾病機(jī)制研究的深入，新的實(shí)驗(yàn)結(jié)果或結(jié)論可能會(huì)修改文中的描述，還請(qǐng)大家理解。

本文不屬于治療方案推薦，如需獲得治療方案指導(dǎo)，請(qǐng)前往正規(guī)醫(yī)院就診。