蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)表征方法檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹

dànbáizhì是生命活動(dòng)的基本物質(zhì)，其結(jié)構(gòu)和功能密切相關(guān)。dànbáizhì的一級(jí)結(jié)構(gòu)是指其氨基酸的線性排列順序，它是其他更gāojí結(jié)構(gòu)（如二級(jí)、三級(jí)和四級(jí)結(jié)構(gòu)）形成的基礎(chǔ)。準(zhǔn)確解析dànbáizhì的一級(jí)結(jié)構(gòu)對(duì)于理解其生物學(xué)功能、研究其結(jié)構(gòu)變化、開(kāi)發(fā)生物藥物、進(jìn)行dànbáizhì工程改造等方面具有重要意義。當(dāng)前，在生物醫(yī)藥、dànbáizhì組學(xué)、分子生物學(xué)等領(lǐng)域，對(duì)dànbáizhì一級(jí)結(jié)構(gòu)的表征需求不斷上升。

一、質(zhì)譜法（Mass Spectrometry, MS）

質(zhì)譜法是當(dāng)前研究dànbáizhì一級(jí)結(jié)構(gòu)zuì常用的技術(shù)之一。它通過(guò)測(cè)定離子的質(zhì)荷比（m/z）來(lái)分析分子的質(zhì)量信息。用于dànbáizhì一級(jí)結(jié)構(gòu)分析時(shí)，常結(jié)合酶解方法對(duì)dànbáizhì進(jìn)行切割，然后通過(guò)質(zhì)譜儀檢測(cè)所得肽段的質(zhì)量和序列。常見(jiàn)的質(zhì)譜儀包括電噴霧電離質(zhì)譜（ESI-MS）和基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時(shí)間質(zhì)譜（MALDI-TOF MS）。這些技術(shù)能夠快速提供肽段的jīngquè質(zhì)量信息，結(jié)合串聯(lián)質(zhì)譜（MS/MS）技術(shù)，還可以進(jìn)一步獲得肽段的氨基酸序列，從而實(shí)現(xiàn)dànbáizhì一級(jí)結(jié)構(gòu)的解析。質(zhì)譜技術(shù)具有靈敏度高、分析速度快、適用于復(fù)雜樣品的優(yōu)勢(shì)，在dànbáizhì組學(xué)、生物標(biāo)志物篩選、抗體藥物開(kāi)發(fā)等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。不過(guò)，對(duì)于特定的dànbáizhì修飾、異構(gòu)體的區(qū)分或N/C端結(jié)構(gòu)的全面解析仍需結(jié)合其他方法。

二、Edman降解法（Edman Degradation）

Edman降解是通過(guò)逐步切除多肽鏈N端的氨基酸，并將每一步生成的衍生物進(jìn)行鑒定，從而逐步解析氨基酸序列。該方法在短肽或低復(fù)雜度dànbáizhì的序列分析中具有較高的準(zhǔn)確性，但其適用范圍受到dànbáizhì長(zhǎng)度限制，一般在30-50個(gè)氨基酸以內(nèi)表現(xiàn)zuì佳。對(duì)于較長(zhǎng)或存在復(fù)雜修飾的dànbáizhì，Edman降解的應(yīng)用可能受到一定限制。此外，該方法對(duì)樣品純度有較高要求，不適用于混合蛋白樣品。盡管Edman降解技術(shù)在高通量和復(fù)雜樣品分析方面不如質(zhì)譜法，但它仍被用于確認(rèn)N端序列或驗(yàn)證質(zhì)譜數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，尤其在特定的dànbáizhì表征流程中仍具價(jià)值。

三、氨基酸組成分析

氨基酸組成分析是對(duì)dànbáizhì水解后得到的氨基酸進(jìn)行定量分析的方法，常用于了解dànbáizhì中各類氨基酸的比例。雖然該方法無(wú)法提供完整的氨基酸序列信息，但可用于輔助判斷dànbáizhì的性質(zhì)、估算分子量、或?qū)σ阎猟ànbáizhì序列進(jìn)行驗(yàn)證。此方法通常通過(guò)酸水解dànbáizhì樣品，然后用高效液相色譜（HPLC）對(duì)所得氨基酸進(jìn)行分離與定量。需要注意的是，在水解過(guò)程中，某些氨基酸可能發(fā)生降解或改性，從而影響測(cè)定結(jié)果。該技術(shù)主要用于dànbáizhì結(jié)構(gòu)的初步研究或作為其他表征方法的補(bǔ)充手段，在藥物質(zhì)量控制、生物制品開(kāi)發(fā)等領(lǐng)域亦有應(yīng)用價(jià)值。

四、N端和C端分析

dànbáizhì的N端和C端結(jié)構(gòu)對(duì)于其生物學(xué)活性和穩(wěn)定性具有重要影響。N端和C端分析是一級(jí)結(jié)構(gòu)表征的關(guān)鍵組成部分，常用于判斷dànbáizhì是否被正確表達(dá)、加工或翻譯后修飾。N端分析可通過(guò)Edman降解、質(zhì)譜法或?qū)ｉT(mén)的化學(xué)衍生技術(shù)實(shí)現(xiàn)。而C端的結(jié)構(gòu)表征由于其化學(xué)特性較弱、易被降解，在技術(shù)實(shí)現(xiàn)上相對(duì)困難，通常依賴高靈敏度的質(zhì)譜分析和特異性的酶解策略。對(duì)N/C端的jīngquè分析在重組蛋白驗(yàn)證、dànbáizhì表達(dá)優(yōu)化以及免疫原設(shè)計(jì)等方面有著直接的應(yīng)用價(jià)值。

五、生物信息學(xué)工具與數(shù)據(jù)庫(kù)輔助

隨著dànbáizhì數(shù)據(jù)庫(kù)和生物信息學(xué)工具的發(fā)展，一級(jí)結(jié)構(gòu)表征已不僅依賴實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，也越來(lái)越多地借助計(jì)算分析手段。例如，通過(guò)對(duì)質(zhì)譜數(shù)據(jù)進(jìn)行比對(duì)分析，可在公共數(shù)據(jù)庫(kù)中找到匹配的dànbáizhì序列，從而推斷目標(biāo)蛋白的一級(jí)結(jié)構(gòu)。此外，多個(gè)序列分析平臺(tái)支持預(yù)測(cè)信號(hào)肽、跨膜結(jié)構(gòu)域、酶切位點(diǎn)、二級(jí)結(jié)構(gòu)趨勢(shì)等信息，為dànbáizhì的綜合分析提供了便利。這些工具極大提升了一級(jí)結(jié)構(gòu)分析的效率與準(zhǔn)確性，尤其在高通量研究中發(fā)揮著重要作用。

dànbáizhì一級(jí)結(jié)構(gòu)的表征是生命科學(xué)研究中的基礎(chǔ)工作之一，現(xiàn)有方法有Edman降解法、質(zhì)譜法、N端和C端分析等，構(gòu)成了一個(gè)多維度、互為補(bǔ)充的技術(shù)體系。不同方法各具特點(diǎn)，常根據(jù)研究對(duì)象的性質(zhì)、研究目的以及資源條件進(jìn)行合理選擇與組合。對(duì)于科研機(jī)構(gòu)和生物制藥企業(yè)而言，選擇zhuānyè、可靠的合作平臺(tái)同樣關(guān)鍵。百泰派克生物科技在dànbáizhì結(jié)構(gòu)鑒定方面擁有豐富的技術(shù)經(jīng)驗(yàn)和完善的技術(shù)平臺(tái)，能夠?yàn)橄嚓P(guān)研究與開(kāi)發(fā)提供技術(shù)支持和服務(wù)保障。

百泰派克生物科技特色項(xiàng)目

一、蛋白測(cè)序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測(cè)序系統(tǒng)對(duì)dànbáizhì序列進(jìn)行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測(cè)序分析服務(wù)，包括對(duì)dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對(duì)于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測(cè)序法的dànbáizhì從頭測(cè)序服務(wù)，對(duì)蛋白序列進(jìn)行分析。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.采用目前世界上優(yōu)良的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實(shí)現(xiàn)對(duì)所測(cè)定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測(cè)定蛋白N端多達(dá) 70個(gè)氨基酸序列;

4.可測(cè)定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測(cè);

6.測(cè)序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺(tái)結(jié)合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學(xué)、靶向dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種dànbáizhì組學(xué)分析服務(wù)。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學(xué)服務(wù)，助力微量樣本蛋白組學(xué)、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1 .高通量定量蛋白分析:多對(duì)照組大規(guī)模實(shí)驗(yàn)分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法，適用于分析組織、細(xì)胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測(cè)較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確。

三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細(xì)胞原理分離單個(gè)細(xì)胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個(gè)細(xì)胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號(hào)分子表達(dá)量。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.技術(shù)優(yōu)良，*技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問(wèn)題。可在單細(xì)胞層面上對(duì)多種指標(biāo)同時(shí)進(jìn)行表征，百泰派克生物科技可做到同時(shí)檢測(cè)51個(gè)目標(biāo)蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個(gè)左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)了數(shù)量級(jí)的提高，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機(jī)制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會(huì)有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測(cè)細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實(shí)現(xiàn)10,000個(gè)以上I型多肽和10,000個(gè)以上II型多肽的鑒定和識(shí)別。通過(guò)我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺(tái)進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析，可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識(shí)別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標(biāo)。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級(jí)結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測(cè)平臺(tái)

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測(cè)和項(xiàng)目驗(yàn)證等zhuānyè服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則，通過(guò)CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計(jì)量/期間核查，軟件審計(jì)追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù)，支持新藥研發(fā)、藥物申報(bào)注冊(cè)和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測(cè)分析服務(wù)；

2.獲國(guó)家CNAS實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù)；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、代謝組學(xué)、生物藥物表征、單細(xì)胞分析、單細(xì)胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測(cè)平臺(tái)，滿足您一站式服務(wù)需求；

5.服務(wù)3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

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