酶標(biāo)分析儀:從原理到應(yīng)用的全面解析-賽默飛
賽默飛全自動(dòng)酶標(biāo)分析儀可測(cè)量包括光吸收、熒光、化學(xué)發(fā)光或時(shí)間分辨熒光等各種信號(hào)。包括專(zhuān)用酶標(biāo)儀和可升級(jí)的多功能酶標(biāo)儀,既可滿(mǎn)足您當(dāng)前的實(shí)驗(yàn)需要,也可滿(mǎn)足您實(shí)驗(yàn)室未來(lái)的升級(jí)需要。賽默飛全自動(dòng)酶標(biāo)分析儀具有多種功能,可幫助您節(jié)省時(shí)間并最大限度提高工作效率,如自我診斷和自動(dòng)校準(zhǔn)、易用的 SkanIt 電腦軟件以及自動(dòng)化兼容。
哪款酶標(biāo)分析儀更適合您?
賽默飛酶標(biāo)儀具有靈活性、高性能和易用性??商峁┌ü馕?、熒光、化學(xué)發(fā)光、時(shí)間分辨熒光和 AlphaScreen等檢測(cè)模式。您可根據(jù)應(yīng)用方向、樣品量和總體實(shí)驗(yàn)室需求選擇適合您的酶標(biāo)儀。還可查看以下儀器分類(lèi)和相關(guān)參數(shù)對(duì)比,更能通過(guò)酶標(biāo)儀型號(hào)了解更多詳細(xì)信息。
酶標(biāo)分析儀選擇指南
1、Multiskan FC:傳承40多年經(jīng)驗(yàn)設(shè)計(jì)而成,著名 Multiskan品牌的易用型酶標(biāo)儀。該儀器通過(guò)創(chuàng)新的檢測(cè)設(shè)計(jì)和內(nèi)置的自我診斷,可在 ELISA 檢測(cè)或各種其他研究和常規(guī)應(yīng)用中提供成熟性能和可靠結(jié)果。
2、Multiskan SkyHigh:全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀是各種終點(diǎn)法、動(dòng)力學(xué)和光譜檢測(cè)的理想選擇。配備適合獨(dú)立使用的大觸摸屏,并配有適用于最常見(jiàn) DNA、RNA 和蛋白檢測(cè)的現(xiàn)成檢測(cè)方案。 提供對(duì) Thermo Fisher Connect 和 Microsoft OneDrive 云端工具的訪(fǎng)問(wèn),以實(shí)現(xiàn)安全和遠(yuǎn)程數(shù)據(jù)管理。
3、Varioskan ALF:一款通用型多功能酶標(biāo)儀,可實(shí)現(xiàn)多種檢測(cè),包括UV/Vis光吸收、熒光和化學(xué)發(fā)光檢測(cè)。SkanIt PC軟件具有經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的程序和可視化的工作流程,易于使用和可輕松完成數(shù)據(jù)分析。
4、Varioskan LUX:提供多達(dá)五種測(cè)量技術(shù)的多功能酶標(biāo)儀,包括光吸收、熒光、化學(xué)發(fā)光、時(shí)間分辨熒光和 Alpha。在所有應(yīng)用中均具有出色性能,它還提供了多種自動(dòng)化功能,可幫助您節(jié)省時(shí)間并減少實(shí)驗(yàn)中的常見(jiàn)錯(cuò)誤。
酶標(biāo)儀原理
普通光吸收酶標(biāo)儀的工作原理主要基于光電比色法,也稱(chēng)為分光光度計(jì)。其基本原理是利用光源發(fā)出的光波,經(jīng)過(guò)濾光片或光柵變成一束單色光,然后進(jìn)入微孔板中的待測(cè)樣品中。當(dāng)樣品中的分子吸收特定波長(zhǎng)的光時(shí),會(huì)根據(jù)其濃度產(chǎn)生不同的吸光值。酶標(biāo)儀通過(guò)檢測(cè)這些吸光值來(lái)定量分析樣品中的成分。
普通光吸收酶標(biāo)儀的核心功能是利用酶聯(lián)免疫技術(shù),通過(guò)抗原和抗體的特異性反應(yīng)進(jìn)行檢測(cè)。具體來(lái)說(shuō),酶標(biāo)儀將抗原或抗體與酶結(jié)合形成酶標(biāo)抗原或抗體,這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留了免疫活性,又保留了酶的活性。當(dāng)酶標(biāo)抗原或抗體與固相載體上的相應(yīng)抗原或抗體發(fā)生特異反應(yīng)并結(jié)合后,通過(guò)洗滌的方法將未結(jié)合的物質(zhì)去除,從而形成穩(wěn)定的抗原-抗體-酶復(fù)合物。然后,酶催化底物反應(yīng)產(chǎn)生可檢測(cè)的信號(hào),如顏色變化或熒光強(qiáng)度,通過(guò)測(cè)量這些信號(hào)來(lái)定量分析樣品中的目標(biāo)分子。
此外,酶標(biāo)儀可以進(jìn)行多種檢測(cè)模式,包括吸光度(Abs)、熒光強(qiáng)度(FI)、時(shí)間分辨熒光(TRF)、Alpha和化學(xué)發(fā)光(Lum)等。這些檢測(cè)模式使得酶標(biāo)儀在生物醫(yī)學(xué)研究、臨床診斷、藥物篩選和食品安全監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用。
酶聯(lián)免疫技術(shù)在酶標(biāo)儀中的應(yīng)用機(jī)制有哪些詳細(xì)步驟?
酶聯(lián)免疫技術(shù)(ELISA)在酶標(biāo)儀中的應(yīng)用機(jī)制主要包括以下幾個(gè)詳細(xì)步驟:
1. 固相載體的準(zhǔn)備:首先,將特異性抗體與固相載體連接,形成固相抗體。這一步驟確??贵w能夠固定在載體表面,并保持其免疫活性。
2. 樣品處理:將待檢樣本加入固相載體,使其與表面吸附的抗體或抗原發(fā)生反應(yīng)。如果檢測(cè)的是抗原,受檢抗原和酶標(biāo)抗原會(huì)競(jìng)爭(zhēng)與固相抗體結(jié)合。
3. 洗滌:反應(yīng)完成后,需要進(jìn)行洗滌步驟,以去除未結(jié)合的物質(zhì)。這一步驟是確保只有特異性結(jié)合的復(fù)合物留在固相載體上。
4. 加入酶標(biāo)抗體:隨后,加入酶標(biāo)記的抗體(如酶標(biāo)抗抗體),使其與目標(biāo)抗原-抗體復(fù)合物結(jié)合。酶標(biāo)抗體也保留了其免疫活性和酶的活性。
5. 顯色反應(yīng):加入酶促底物,酶催化底物發(fā)生顯色反應(yīng)。通過(guò)觀(guān)察顯色反應(yīng)的程度,可以定量分析待測(cè)物質(zhì)的含量。
6. 信號(hào)檢測(cè):最后,使用酶標(biāo)儀檢測(cè)顯色反應(yīng)產(chǎn)生的信號(hào)。酶標(biāo)儀通過(guò)測(cè)量吸光度來(lái)定量分析樣品中的目標(biāo)物質(zhì)。
酶標(biāo)儀的不同檢測(cè)模式(吸光度、熒光強(qiáng)度、時(shí)間分辨熒光、Alpha和化學(xué)發(fā)光)各自的工作原理和應(yīng)用場(chǎng)景是什么?
酶標(biāo)儀的不同檢測(cè)模式包括吸光度、熒光強(qiáng)度、時(shí)間分辨熒光、Alpha和化學(xué)發(fā)光,各自的工作原理和應(yīng)用場(chǎng)景如下:
1. 吸光度檢測(cè):
· 工作原理:吸光度檢測(cè)是通過(guò)測(cè)量樣品在特定波長(zhǎng)下的光吸收值來(lái)定量分析樣品中的生物分子含量。當(dāng)光通過(guò)樣品時(shí),樣品會(huì)吸收一定量的光能量,剩余的光能量被檢測(cè)器測(cè)量,從而計(jì)算出樣品的吸光度值。
· 應(yīng)用場(chǎng)景:吸光度檢測(cè)廣泛應(yīng)用于酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)技術(shù)中,用于測(cè)定核酸、蛋白質(zhì)等生物分子的濃度。此外,它還用于細(xì)胞增殖和毒性檢測(cè)等生物學(xué)研究。
2. 熒光強(qiáng)度檢測(cè):
· 工作原理:熒光強(qiáng)度檢測(cè)是基于樣品中熒光物質(zhì)的濃度與其發(fā)出的熒光強(qiáng)度成正比的原理。通過(guò)測(cè)量熒光信號(hào)的強(qiáng)度,可以定量分析樣品中的目標(biāo)分子含量。
· 應(yīng)用場(chǎng)景:熒光強(qiáng)度檢測(cè)在生物學(xué)研究中應(yīng)用廣泛,包括生物大分子定量、酶活性分析、熒光免疫分析、細(xì)胞學(xué)分析(如細(xì)胞增殖、細(xì)胞毒理、細(xì)胞吸附等)和分子間相互作用研究。
3. 時(shí)間分辨熒光(TRF):
· 工作原理:時(shí)間分辨熒光檢測(cè)利用熒光共振能量傳遞(FRET)技術(shù),通過(guò)測(cè)量不同時(shí)間延遲下的熒光信號(hào)強(qiáng)度來(lái)提高檢測(cè)靈敏度和特異性。這種方法可以減少背景信號(hào)的干擾,提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性。
· 應(yīng)用場(chǎng)景:時(shí)間分辨熒光檢測(cè)常用于高靈敏度的生物分子定量分析,如蛋白質(zhì)相互作用研究和核酸雜交實(shí)驗(yàn)。
4. Alpha檢測(cè):
· 工作原理:Alpha技術(shù),即Amplified Luminescent Proximity Homogeneous Assay (Amplified Luminescence Proximity Homogeneous Assay),使用供體微珠和受體微珠。供體微珠包含光敏劑,在680nm激光照射下,光敏劑將氧分子轉(zhuǎn)化為單線(xiàn)態(tài)氧。如果受體微珠在附近(<200nm),單線(xiàn)態(tài)氧會(huì)觸發(fā)受體微珠上的化學(xué)反應(yīng),最終產(chǎn)生光信號(hào)。這個(gè)過(guò)程基于微珠之間的接近程度來(lái)檢測(cè)相互作用?。
· 應(yīng)用場(chǎng)景:Alpha技術(shù)具有高靈敏度和免洗板的優(yōu)點(diǎn),適用于藥物發(fā)現(xiàn)階段的高通量篩選。該技術(shù)已經(jīng)得到國(guó)內(nèi)外藥物研發(fā)企業(yè)和科研院所的廣泛認(rèn)可。Alpha技術(shù)家族包括AlphaScreen和AlphaLISA,后者特別適用于血清/血漿樣品的檢測(cè),能夠有效避免熒光背景干擾。
5. 化學(xué)發(fā)光檢測(cè):
· 工作原理:化學(xué)發(fā)光檢測(cè)是基于化學(xué)發(fā)光反應(yīng)和酶標(biāo)技術(shù)的結(jié)合。通過(guò)檢測(cè)化學(xué)發(fā)光信號(hào)來(lái)定量分析樣本中的特定物質(zhì)。發(fā)光物質(zhì)在反應(yīng)劑激發(fā)下生成激發(fā)態(tài)中間體,直接標(biāo)記在抗原或抗體上,或酶作用于發(fā)光底物。
· 應(yīng)用場(chǎng)景:化學(xué)發(fā)光檢測(cè)廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)領(lǐng)域(報(bào)告基因檢測(cè)),農(nóng)業(yè)中的農(nóng)藥殘留檢測(cè)和食品安全檢測(cè)。此外,它還用于臨床實(shí)驗(yàn)室中的各種生物標(biāo)志物的定量分析。結(jié)合熒光的生物發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移(BRET),可進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)實(shí)時(shí)蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用檢測(cè)。
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賽默飛世爾科技(中國(guó))有限公司
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