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3D光片顯微技術與寬場顯微技術的不同之處在哪里

閱讀:2253      發(fā)布時間:2022-10-25
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光片熒光顯微技術能夠以很高的三維分辨率對生物樣本進行長時間的、較為溫和的3D成像。特別是當該技術與高速照相機相結合時,就能夠快速地捕捉細胞或亞細胞水平上的動態(tài)變化。
從原理上來講,3D光片顯微技術與傳統(tǒng)的寬場顯微技術或共聚焦顯微技術有很大不同,后兩者需要照射或掃描成像目標物中的整個樣本,而光片顯微鏡只需要用薄層光(實際上為2D)從側邊照射樣本。隨后從樣本的上部或下部檢測所產(chǎn)生的熒光信號,檢測方向與薄層光線的照射方向相垂直。因此,該技術的光學層析能力(optical sectioning,即z層面上樣本結構的分辨能力)不像共聚焦成像技術那樣取決于焦點處光子的采集,而是來自于在開始時每次僅激發(fā)一個層面上的熒光基團。換言之,光片顯微技術只會激發(fā)一個焦平面上或旁邊的分子,因此降低了光毒性,并且提高了長時間對活體樣本進行成像的能力?;?D光片熒光顯微鏡本身的技術特點,該系統(tǒng)滿足了快速、大體積3D成像、低光毒性及長時間成像的需要。
Phaseview 3D光片顯微成像系統(tǒng)應用領域:
1、模式動物整體3D成像:果蠅,斑馬魚,線蟲等;
2、動物器官3D成像:心臟、腦、眼、耳等器官發(fā)育;
3、神經(jīng)生物學研究:大腦和神經(jīng)活性的3D功能成像;
4、3D高分辨率、高速實時成像:透明化樣本3D成像、熒光標記的活體樣本的結構特性、微弱熒光信號的高速3D成像;
5、3D細胞長時程培養(yǎng)實時成像;
6、免疫生物學研究:淋巴結成像,抗原抗體成像等;
7、形態(tài)和發(fā)育生物學研究:胚胎成像;
8、細胞動態(tài)過程的快速成像,例如:細胞遷移、血流、血管發(fā)育、Ca2+成像;
9、海洋生物熒光成像:海鞘、魷魚、浮游生物及扁形蟲;
10、植物生物學研究:觀察敏感的發(fā)育過程和執(zhí)行生理測量;
11、藥物藥理毒理及藥代動力學研究。
 

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