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實(shí)驗(yàn)常見(jiàn)問(wèn)題:bEnd.3細(xì)胞形態(tài)異常?從接種密度到代謝廢物排查步驟

時(shí)間:2025-6-18 閱讀:150
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通過(guò)感染表達(dá)多瘤病毒中T抗原的NTKmT逆轉(zhuǎn)錄病毒載體來(lái)轉(zhuǎn)化細(xì)胞。

別稱:bEND.3;b.End3;Bend.3;bEnd3;brain-derived Endothelial cells.3
種屬:小鼠
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
凍存條件:凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40% FBS+5% DMSO
:溫度:液氮
培養(yǎng)方案A(默認(rèn)):生長(zhǎng)培養(yǎng)基:DMEM+10% FBS+1% P/S
:培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO?,5%, 溫度:37℃
推薦傳代比例:1:2-1:4
推薦換液頻率:2-3次/周
組織來(lái)源:大腦皮層
細(xì)胞類型:轉(zhuǎn)化細(xì)胞系
生物安全等級(jí):BSL-1
保藏機(jī)構(gòu):ATCC; CRL-2299 BCRC; 60515 ECACC; 96091929

注意事項(xiàng)

1.該細(xì)胞在低密度下形態(tài)不規(guī)則,細(xì)胞數(shù)量少,鋪展面積大,高密度后形態(tài)會(huì)趨于一致,胞體密集。

2.細(xì)胞增殖偏慢,初次傳代建議1:2,細(xì)胞穩(wěn)定后建議傳代比例也不超過(guò)1:4。

3.注意觀察培養(yǎng)基顏色,顏色偏紫會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞漂浮增加。

4.消化時(shí)間會(huì)隨著細(xì)胞生長(zhǎng)時(shí)間和細(xì)胞密度而有所不同,需要結(jié)合消化時(shí)細(xì)胞狀態(tài)來(lái)判斷,消化到細(xì)胞可以滑落方可終止。

常見(jiàn)問(wèn)題

Q1:bEnd.3細(xì)胞培養(yǎng)的時(shí)候有較多漂浮的細(xì)胞和碎片是否正常?

細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中會(huì)有大約10%活細(xì)胞單顆漂浮,這部分細(xì)胞單獨(dú)培養(yǎng)不會(huì)貼壁,培養(yǎng)過(guò)程中不用特別處理,生長(zhǎng)過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生碎片。

Q2:bEnd.3細(xì)胞通常消化多久?

細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間越長(zhǎng)越難消化,每次消化時(shí)間可能不固定,消化時(shí)以細(xì)胞鏡下?tīng)顟B(tài)為準(zhǔn),細(xì)胞觸角收縮,細(xì)胞間隙明顯變大,輕拍培養(yǎng)瓶細(xì)胞可以脫落時(shí)可終止消化,注意輕柔吹打細(xì)胞。

Q3:bEnd.3細(xì)胞形態(tài)有很多觸角是否正常?為什么低密度和高密度細(xì)胞形態(tài)不一樣?

這個(gè)細(xì)胞低密度呈現(xiàn)不規(guī)則細(xì)胞形態(tài),細(xì)胞鋪展會(huì)比較大,高密度呈規(guī)則纖維狀形態(tài)會(huì)更規(guī)則。

引用文獻(xiàn)

  • Engineered Extracellular Vesicles Modified by Angiopep-2 Peptide Promote Targeted Repair of Spinal Cord Injury and Brain Inflammation(2025)

    期刊:ACS Nano

    DOI:10.1021/acsnano.4c14675

    影響因子:15.8

    引用產(chǎn)品: C8-D1A 細(xì)胞, bEnd.3 [BEND3] 細(xì)胞

  • Traditional Chinese Medicine Borneol-Based Polymeric Micelles Intracerebral Drug Delivery System for Precisely Pathogenesis-Adaptive Treatment of Ischemic Stroke(2025)

    期刊:Advanced Science

    DOI:10.1002/advs.202410889

    影響因子:14.3

    引用產(chǎn)品: BV2 細(xì)胞, bEnd.3 [BEND3] 細(xì)胞, SH-SY5Y [SHSY-5Y] 細(xì)胞


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