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PriCells: 臺盼藍(lán)染色法
PriCells: 臺盼藍(lán)染色法
材料：
1. 顯微鏡、玻片、蓋玻片、滴管；
2. 試劑：0.4%臺盼藍(lán)染液；
3. 臺盼藍(lán)（Trypan blue）：0.4g；
4. 生理鹽水：100ml；
操作步驟：
1. 用Hanks液配制0.1%臺盼藍(lán)溶液；
2. 用0.5%胰蛋白酶：0.2%EDTA=1：1混合液來消化培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞；
3. 再加入適量Hanks液制成細(xì)胞懸液；
4. 將待染色細(xì)胞稀釋至所需濃度（方法及濃度范圍與細(xì)胞計數(shù)相同）；
5. 每0.1ml細(xì)胞懸液約加新鮮配制的染液一小滴，室溫下染3—5min；
6. 染色過的細(xì)胞材料，取一滴細(xì)胞懸液置玻片上，加蓋玻片后放高倍鏡下觀察；
7. 死亡的細(xì)胞著淺藍(lán)色并膨大，無光澤。活細(xì)胞不著色并保持正常形態(tài)，有光澤；
8. 計數(shù)1000個細(xì)胞中的活細(xì)胞和死細(xì)胞數(shù)目；
9. 統(tǒng)計未染色細(xì)胞?？砂垂接嬎愠黾?xì)胞活率。
細(xì)胞活率（%）=未染色的細(xì)胞數(shù)/觀察的細(xì)胞總數(shù)×100
注意事項：
1. 染色時間不能太長，否則活細(xì)胞也會逐漸積累染料而染成顏色，使監(jiān)測結(jié)
果偏低；
2. 另可結(jié)合細(xì)胞計數(shù)方法，同時進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)和活力檢測；