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大鼠糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA試劑盒

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  大鼠糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)的含量,采用雙抗體夾心法進(jìn)行測定。?

  實驗原理?

  本試劑盒通過雙抗體夾心法來測定標(biāo)本中的大鼠糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)水平。首先用純化的大鼠糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)抗體包被微孔板,制成固相抗體。然后往包被單抗的微孔中依次加入糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB),再與HRP標(biāo)記的糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物。經(jīng)過洗滌后加底物TMB顯色,TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺與樣品中的糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)呈正相關(guān),可以通過酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),并利用標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中大鼠糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)的濃度?。

  試劑盒組成?

  試劑盒包括:

  微孔板

  標(biāo)準(zhǔn)品

  酶標(biāo)試劑

  樣品稀釋液

  顯色劑A液和B液

  終止液

  濃縮洗滌液等?

  操作步驟?

  樣本處理?:根據(jù)樣本類型(如血清、血漿等)進(jìn)行相應(yīng)的處理,如離心以去除顆粒和聚合物。

  加樣?:將標(biāo)準(zhǔn)品和樣品加入微孔板中,每個樣品設(shè)置復(fù)孔以提高準(zhǔn)確性。

  溫育和洗滌?:將微孔板密封后置于37℃下溫育30分鐘,然后進(jìn)行洗滌以去除未結(jié)合的物質(zhì)。

  顯色和測定?:加入顯色劑后觀察顏色變化,并在酶標(biāo)儀上測定各孔的吸光度(OD值)。

  數(shù)據(jù)分析?:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)的濃度?。

  注意事項?

  試劑保存?:試劑應(yīng)在2-8℃下保存,避免反復(fù)冷凍。

  操作建議?:避免細(xì)胞刺激和熱源污染,使用無熱原和內(nèi)毒素的試管收集血液樣本。

  安全防護(hù)?:實驗過程中應(yīng)避免直接接觸終止液和底物A、B,以免對皮膚造成傷害?。


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