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微生物法尼基焦磷酸合酶(FPS)ELISA科研試劑盒

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  微生物法尼基焦磷酸合酶(FPS)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)使用說明書通常包含以下關(guān)鍵信息,以下是一個(gè)基于通用ELISA試劑盒說明書的示例:

  BS-5186-A   微生物法尼基焦磷酸合酶(FPS)ELISA科研試劑盒96T

  BS-5186-B   微生物法尼基焦磷酸合酶(FPS)ELISA科研試劑盒48T

  一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

  用于測定微生物樣本中法尼基焦磷酸合酶(FPS)的含量,適用于科研試驗(yàn)。

  二、實(shí)驗(yàn)原理

  試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。用純化的法尼基焦磷酸合酶(FPS)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入法尼基焦磷酸合酶(FPS),再與辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的法尼基焦磷酸合酶(FPS)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物。經(jīng)過洗滌后加底物TMB顯色,TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的法尼基焦磷酸合酶(FPS)含量呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中法尼基焦磷酸合酶(FPS)濃度。

  三、試劑盒組成

  試劑盒通常包含以下組件(以96孔配置為例):

  ?酶標(biāo)包被板?:1塊(96孔)。

  ?標(biāo)準(zhǔn)品?:1瓶(通常為已知濃度的FPS溶液,用于繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線)。

  ?標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液?:1瓶。

  ?酶標(biāo)試劑?:1瓶(含有HRP標(biāo)記的FPS抗體)。

  ?樣品稀釋液?:1瓶。

  ?顯色劑A液?:1瓶。

  ?顯色劑B液?:1瓶(A液和B液混合后用于顯色反應(yīng))。

  ?終止液?:1瓶。

  ?濃縮洗滌液?:1瓶(使用時(shí)需稀釋)。

  ?封板膜?:2片。

  ?密封袋?:1個(gè)。

  ?說明書?:1份。

  四、樣本收集與處理

  樣本類型包括但不限于血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞上清等。收集樣本后,應(yīng)按要求進(jìn)行離心、分裝和保存,避免反復(fù)凍融。

  五、操作步驟

  從室溫平衡后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃保存。

  設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。

  除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入酶標(biāo)試劑100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育一定時(shí)間(如60min)。

  棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置后甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板多次(如5次)。

  每孔加入顯色劑A、B各50μL,37℃避光孵育一定時(shí)間(如15min)。

  每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

  六、結(jié)果計(jì)算

  以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)OD值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線。根據(jù)待測樣本的OD值,在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查找對(duì)應(yīng)的FPS濃度。

  七、注意事項(xiàng)

  實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)保持實(shí)驗(yàn)環(huán)境的清潔和衛(wèi)生,避免交叉污染。

  嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件,如溫度、時(shí)間等,以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。

  使用前應(yīng)仔細(xì)閱讀說明書,并嚴(yán)格按照說明書中的操作步驟進(jìn)行。

  試劑盒應(yīng)在規(guī)定的保存條件下保存,避免過期使用。

  請(qǐng)注意,不同品牌的微生物法尼基焦磷酸合酶(FPS)ELISA試劑盒在組成和操作步驟上可能略有差異,因此在使用前應(yīng)仔細(xì)閱讀具體品牌的說明書。

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