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技術(shù)文章

影響ELISA試驗(yàn)結(jié)果必看事項(xiàng)清點(diǎn)

閱讀:940          發(fā)布時(shí)間:2023-5-5

  ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在科研領(lǐng)域上得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)實(shí)驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。影響ELISA試驗(yàn)結(jié)果必看事項(xiàng)清點(diǎn):

1、操作應(yīng)對(duì)試驗(yàn)的物理參數(shù)有充沛的了解,如環(huán)境溫度(保持在18 c~25℃)、反響孵育溫度和孵育時(shí)刻、洗刷的次數(shù)等,要先查看水育箱溫度,是否符合要求。


2. 正確運(yùn)用加樣器加樣器應(yīng)筆直參加標(biāo)本或試劑,ELISA試劑盒防止刮擦包被板底部。加樣過程中防止液體外濺,血清殘留在反響孔壁上,加樣器吸頭要清洗干凈,防止污染,加樣次序要與說明書共同,否則可導(dǎo)致成果過錯(cuò),試驗(yàn)重復(fù)性差。


3. 手工洗板加洗液時(shí)沖擊力不要太大,洗刷次數(shù)不要超越說明書引薦的洗刷次數(shù),洗液在反響孑l內(nèi)滯留的時(shí)刻不宜太長(zhǎng)。不要使洗液在孑l間竄流,形成孔問污染,導(dǎo)致假陰性或假陽(yáng)性。


4. 要保證加液量共同 我們?cè)谶\(yùn)用時(shí)感覺滴瓶加液不如加樣器好,滴瓶不易控制加液量禁絕,形成顯色不統(tǒng)一,判別過錯(cuò)。


5. 顯色液量不行過多 加樣的工作環(huán)境不能處于陽(yáng)光直射的環(huán)境下,加顯色體系后要避光反響,顯色液量不能過多,避免顯色過強(qiáng)。ELISA試劑盒的影響因素應(yīng)選用有國(guó)家批準(zhǔn)文號(hào),質(zhì)量靠得住的產(chǎn)品,不能圖廉價(jià),忽視質(zhì)量bao證。試劑應(yīng)妥善保存于4℃冰箱內(nèi),在運(yùn)用時(shí)先平衡至室溫,不同批號(hào)的試劑組分不宜交叉運(yùn)用。試劑敞開后要在一周內(nèi)用完,剩下的試劑下次用時(shí)應(yīng)先查看是否蛻變,顯色劑如被污染變色將形成全部顯色,導(dǎo)致過錯(cuò)成果。





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