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二、發(fā)酵過程的操作

1. 接種:接種方法可采用火焰接種法或差壓接種法。

(1)火焰接種法:在接種口用酒精火圈消毒，然后打開接種口蓋，迅速將接種液倒入罐內(nèi)，在把蓋擰緊。

(2)差壓法:在滅菌前放入墊片，接種時(shí)把接種口蓋打開，先倒入一定量的酒精消毒。待片刻后把種液瓶的針頭插入接種口的墊片。利用罐內(nèi)壓力和種液瓶內(nèi)的壓力差，將種液引入罐內(nèi)，擰緊蓋子。

2. 罐壓

發(fā)酵過程中須手動(dòng)控制罐壓，即用出口閥控制罐內(nèi)壓力。調(diào)節(jié)空氣流量的，須同時(shí)調(diào)節(jié)出口閥，應(yīng)保持罐內(nèi)壓力恒定大于0.03Mpa。

3. 溶解氧(DO)的測量和控制

(1)溶解氧的標(biāo)定:在接種前，在恒定的發(fā)酵溫度下，將轉(zhuǎn)速及空氣量開到大值時(shí)的溶解氧DO值作為100%。

(2)發(fā)酵過程的溶解氧DO測量和控制:DO的控制可采用調(diào)節(jié)空氣流量和調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速來達(dá)到。*簡單是轉(zhuǎn)速和溶氧的關(guān)聯(lián)控制。其次則必須同時(shí)調(diào)節(jié)進(jìn)氣量(手動(dòng))控制。有時(shí)需要通入純氧(如在某些基因工程菌的高密度培養(yǎng)中)才能達(dá)到要求的DO值。

4. pH 的測量與控制

(1) pH值的校正:在滅菌前應(yīng)對PH電極進(jìn)行PH值的校正。

(2)在發(fā)酵過程中PH值的控制使用蠕動(dòng)泵的加酸加堿來達(dá)到的，酸瓶或堿瓶須先在滅菌鍋中滅菌。