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PCR儀的常見(jiàn)故障原因分析
實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)可檢測(cè)低至1.5倍的基因表達(dá)差異。該系統(tǒng)支持廣泛的基因組學(xué)應(yīng)用，例如分析基因表達(dá)、microRNA和非編碼RNA、拷貝數(shù)變異、藥物代謝酶和蛋白質(zhì)表達(dá)、SNP基因分型以及突變檢測(cè)。
qPCR Cycle Check試劑盒是用于檢查驗(yàn)證熒光定量PCR儀的有力工具。它通過(guò)對(duì)溫度敏感的PCR反應(yīng)來(lái)監(jiān)測(cè)熒光定量PCR儀的溫度變化。它采用的引物/探針的序列經(jīng)巧妙設(shè)計(jì)，能夠?qū)乜仄?、溫度均一性、溫度?zhǔn)確性和耗時(shí)極為敏感。溫度偏差超過(guò)2℃，qPCR的擴(kuò)增反應(yīng)即完全停止。它采用常規(guī)的qPCR程序，模板的濃度也經(jīng)過(guò)預(yù)先設(shè)計(jì)，只有在qPCR高效時(shí)才進(jìn)行擴(kuò)增。
常見(jiàn)故障：
個(gè)別孔擴(kuò)增效率差異很大，可能的原因是半導(dǎo)體模塊出現(xiàn)壞點(diǎn)。
熒光染料污染樣品孔。
PCR管融化，原因可能是溫度傳感器出問(wèn)題或是熱蓋出問(wèn)題。
儀器工作時(shí)出現(xiàn)噪音。
熒光強(qiáng)度減弱或不穩(wěn)定，產(chǎn)生的原因有濾光片發(fā)霉或有水汽，或光源損耗（以鹵鎢燈為光源的），需更換光源；或需調(diào)節(jié)檢測(cè)元件靈敏度。
開(kāi)機(jī)黑屏。
開(kāi)機(jī)錯(cuò)誤模式。
開(kāi)機(jī)報(bào)黃燈。
濾光轉(zhuǎn)輪報(bào)錯(cuò)。
擴(kuò)增曲線不均一。