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離子色譜儀可以檢測糖嗎?
離子色譜儀的原理是通過輸液泵將流動相以穩(wěn)定的流速(或壓力)輸送到分析系統(tǒng)。在色譜柱之前，樣品將被引入樣品注射器。流動相將樣品帶入色譜柱，分離柱中的成分，然后與流動相一起依次流向檢測器。在抑制性離子色譜中，在電導(dǎo)檢測器前增加一個抑制系統(tǒng)，即使用另一個高壓注射泵將再生液輸送到抑制器。在抑制器中，降低流動相的背景電導(dǎo)率，然后將流出物引入電導(dǎo)率檢測單元，并將檢測到的信號發(fā)送到數(shù)據(jù)系統(tǒng)進行記錄、處理或保存。
離子色譜是一種高效液相色譜，也稱為高效離子色譜或現(xiàn)代離子色譜。與傳統(tǒng)的離子交換柱色譜不同，該樹脂交聯(lián)度高、交換容量低、進樣量小。當用柱塞泵輸送洗脫液時，通常要對洗脫液進行在線自動連續(xù)電導(dǎo)率檢測。
從水中常見糖類的pKa值可以看出，常見的單糖、二糖和糖醇的pKa值一般在L2-14之間，常見的糖醛酸和糖胺的pKa值小于7。當堿性溶液的酸堿度大于或等于L2時，大多數(shù)糖基化以陰離子的形式存在，因此陰離子交換色譜柱可作為洗脫液分離強堿性溶液。
由于糖分子結(jié)構(gòu)的疏水部分，糖的分離機理不僅是陰離子交換，還有疏水吸附。碳水化合物在陰離子交換柱上的保留容量主要取決于其電荷數(shù)、分子大小、組成和結(jié)構(gòu)。
安培檢測是一種檢測技術(shù)，它測量電化學(xué)活性物質(zhì)在適當?shù)耐饧与娢幌掳l(fā)生氧化或還原反應(yīng)時電流的變化。糖的分離是在堿性條件下進行的，而金電極的檢測條件通常是堿性的。金電極表面可以為糖的電化學(xué)氧化提供反應(yīng)環(huán)境。因此，金電極檢測與陰離子交換分離有很好的匹配。由于糖的氧化產(chǎn)物會覆蓋電極表面，造成不可逆的污染，因此需要選擇不同的外加電位對電極表面進行清洗和活化，使電極能夠連續(xù)工作，即脈沖安培檢測。