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當(dāng)前位置:江蘇天翎儀器有限公司>>技術(shù)文章>>菌落計(jì)數(shù)器工作原理及使用指南
菌落計(jì)數(shù)器是一種用于快速統(tǒng)計(jì)瓊脂平板表面微生物菌落數(shù)量的儀器,廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、環(huán)境檢測(cè)等領(lǐng)域。以下是其工作原理及使用方法的詳細(xì)說明:
光學(xué)成像原理
多數(shù)現(xiàn)代菌落計(jì)數(shù)器采用高分辨率攝像頭或掃描儀,通過透射光(底部光源)或反射光(頂部光源)對(duì)瓊脂平板進(jìn)行成像。
菌落與培養(yǎng)基的對(duì)比度(如顏色、透明度差異)被轉(zhuǎn)化為數(shù)字圖像。
圖像分析算法
邊緣檢測(cè):識(shí)別菌落的圓形或不規(guī)則輪廓。
閾值分割:通過設(shè)定灰度/顏色閾值區(qū)分菌落與背景(如深色菌落 vs 透明培養(yǎng)基)。
去噪處理:過濾微小氣泡、劃痕等干擾物。
自動(dòng)計(jì)數(shù):統(tǒng)計(jì)符合預(yù)設(shè)大小、形狀的菌落目標(biāo)。
手動(dòng)輔助功能
部分儀器配備觸摸屏或點(diǎn)擊筆,允許用戶手動(dòng)標(biāo)記漏檢菌落或排除誤判目標(biāo)。
校準(zhǔn):第一次使用前需用標(biāo)準(zhǔn)板校準(zhǔn)計(jì)數(shù)精度。
光源調(diào)整:根據(jù)培養(yǎng)基透明度選擇背光(透射)或頂光(反射)模式。
軟件設(shè)置:設(shè)定菌落大小范圍(如0.1-5mm)、顏色閾值(適用于顯色培養(yǎng)基)。
平板要求:菌落分布均勻,避免重疊或蔓延生長(若菌落過密需稀釋后重新培養(yǎng))。
標(biāo)記干擾物:用記號(hào)筆標(biāo)出平板上的氣泡、雜質(zhì),防止誤計(jì)。
放置平板:將培養(yǎng)皿倒置(蓋朝下)放在計(jì)數(shù)平臺(tái)中心。
圖像采集:關(guān)閉環(huán)境光源,啟動(dòng)成像系統(tǒng)獲取清晰圖像。
自動(dòng)計(jì)數(shù):軟件生成初步結(jié)果,顯示菌落位置標(biāo)記(通常以彩色圈標(biāo)示)。
人工復(fù)核:
添加遺漏菌落:通過點(diǎn)擊未識(shí)別的菌落手動(dòng)補(bǔ)計(jì)。
刪除誤計(jì)對(duì)象:剔除被誤判為菌落的雜質(zhì)標(biāo)記。
保存數(shù)據(jù):導(dǎo)出菌落數(shù)量、圖像及檢測(cè)參數(shù)(支持Excel/PDF格式)。
消毒:用70%酒精擦拭計(jì)數(shù)平臺(tái),避免交叉污染。
鏡頭保護(hù):定期用鏡頭紙清潔攝像頭,防止灰塵影響成像。
菌落重疊處理:若菌落重疊超過1/3,需手動(dòng)分割或報(bào)告為"TFTC"(Too Few To Count)。
特殊培養(yǎng)基:如黑色背景的顯色培養(yǎng)基,需調(diào)整光源角度和軟件閾值。
驗(yàn)證要求:依據(jù)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(如ISO 7218)定期進(jìn)行人工復(fù)核,確保誤差<5%。
計(jì)數(shù)偏高:檢查閾值是否過低,或存在未過濾的氣泡。
計(jì)數(shù)偏低:確認(rèn)菌落顏色與背景對(duì)比度,適當(dāng)降低灰度閾值。
成像模糊:清潔培養(yǎng)皿底部污漬,調(diào)整焦距。
通過結(jié)合自動(dòng)化技術(shù)與人工復(fù)核,菌落計(jì)數(shù)器顯著提高了檢測(cè)效率和準(zhǔn)確性,尤其適用于大批量樣本分析。使用時(shí)需根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)需求靈活調(diào)整參數(shù),并嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)范。
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