制備型液相色譜，按照色譜柱和樣品量的大小，可分為以下類型：
(1)低壓液相色譜；
(2)中壓液相色譜；
(3)高壓液相色譜；
(4)快速色譜。低壓、中壓與高壓液相色譜
1、快速色譜
柱壓通常為2bar(或30psi)左右，對于那些容易分離的簡單混合物，由于快速色譜具有操作簡便、經(jīng)濟等優(yōu)點，常常是實驗室的選擇。但快速色譜不同于一般的層析分離，這種分離沒有壓力，而快速分離通常使用瓶裝氮氣加壓，使流動相具有一定的流速，從而縮短了分離時間。
快速色譜使用的柱子一般是玻璃柱，柱直徑為3～10cm.長度為7～15cm?？焖偕V中使用*泛的固定相為硅膠。采用的粒徑通常為：25～40μm，40～63μm或63～200μm的球形固定相。其它如鍵合相、氧化鋁、聚酰胺吸附劑也常用作快速色譜的固定相使用。
2、低壓色譜(LPLC)
柱壓一般低于5bar(或75psi)。
低壓色譜一般是由蠕動泵、進樣閥和檢測器組成，可以連續(xù)化，實現(xiàn)自動的梯度淋洗和餾分收集等操作。色譜柱管一般是玻璃或聚合物材料的，長度一般為240-440mm，內(nèi)徑為10-40mm。
對于大多數(shù)在紫外區(qū)有吸收的物質(zhì)，光學檢測器很常用。填料一般使用軟質(zhì)的葡聚糖、瓊脂糖、纖維素、合成高聚物或離子交換劑，粒徑一般為40-60μm。
3、中壓液相色譜
柱壓在5-20bar(或75-300psi)之間，廣泛用于實驗室和工業(yè)規(guī)模的生物制品(如動物臟器提取液、濃縮液、體液、植物提取液、生物技術(shù)發(fā)酵液等。往往需要經(jīng)過濾膜作初級凈化的處理，以提取或純化所需的產(chǎn)品。
中壓液相制備色譜的主要部件為輸液泵、進樣閥、檢測器、餾分收集器等，比如瑞士公司的早期的中壓液相制備色譜，其輸液泵最大流速可達156mL/min，并配有阻尼器，以保證液流的穩(wěn)定；進樣器配有0.5-50mL的不同體積的定量管；檢測器有紫外和示差折光檢測器，流通池體積比較大，允許大流量流動相通過而無需分流；餾分收集器有原盤式和排式兩種，圓盤式的接收管最多達80個，而排式的則更多；色譜柱內(nèi)徑10-105mm，長度250-1760mm不等。
對于一般中壓制備色譜，當色譜柱直徑較大時，柱頭往往設(shè)計成錐形或有類似于傘狀的液流導(dǎo)向結(jié)構(gòu)，使得當大量樣品進入到柱頭上時，能迅速地分散到整個柱橫截面上，及時被流動相沖走，避免了因樣品的局部過濃而引起柱超負荷和譜帶加寬。柱子填料則采用比較耐壓的交聯(lián)改性的多糖凝膠，聚合物微球，復(fù)合材料介質(zhì)或硬質(zhì)SiO2基質(zhì)的化學鍵合相等，粒徑一般在25～40μm(常用的填料尺寸是15-25μm，25-40μm或40-63μm)，可采用濕法或干法裝柱。
4.高壓液相色譜(HPLC)
這是指柱壓一般大于20bar(或300psi)的“高壓(或高效)液相色譜”，通常指所用色譜柱的塔板數(shù)大于2000，一般是在2000～20000的范圍之間。
當需要從大量的物質(zhì)中分離純化不足1%的所需成分時，分離工作將會十分困難，往往在純化的最后階段需要使用10μm或更小顆粒的高效填料。為獲得所需微量組分，可采用如下分離手段：制備型分離→半制備型分離→分析型分離→產(chǎn)物。為提高每次分離獲得純品的數(shù)量，制備型高壓液相色譜分離通常在超載情況下運行。
高壓液相色譜，即目前常用的高效液相色譜。色譜柱內(nèi)填裝的是粒度范圍較窄的微小顆粒固定相(3～30μm)，為使流動相流出，需采用較高的壓力，同時系統(tǒng)的復(fù)雜性及成本亦增大，但分辨率可得到較大的提高。而填裝較大顆粒的固定相時，如中壓液相色譜系統(tǒng)，裝柱較容易，柱的通透性較高(只需較低的泵壓力)，可采用更大的色譜柱和更經(jīng)濟的儀器，由此分辨率也較低。
制備型液相色譜滿足從毫克級到克級樣品的純化，適用于制備液相色譜分離方法的開發(fā)和優(yōu)化，既可以在摸索方法時節(jié)省樣品和溶劑，又可以獲得一定數(shù)量的純品，高?？蒲腥藛T和企業(yè)研發(fā)人員分離純化得力助手。
6
立即詢價
您提交后，專屬客服將第一時間為您服務(wù)