nicotinamide
摘要:本文建立了煙酰胺、煙酰胺單核苷酸、AMP、ADP、ATP等5種化合物的HPLC測定方法。采用色譜柱Shim-pack Scepter C18-120進(jìn)行分析,5種化合物的分離度良好,峰形和重現(xiàn)性良好,滿足檢測需求。此方法可為煙酰胺、煙酰胺單核苷酸、AMP、ADP、ATP等5種化合物的分析提供參考。
關(guān)鍵詞:煙酰胺單核苷酸 煙酰胺 AMP ADP ATP Shim-pack Scepter C18-120 HPLC
1 實(shí)驗(yàn)部分
1.1 實(shí)驗(yàn)儀器及耗材
Shimadzu LC-40B X3高效液相色譜儀;
色譜柱:Shim-pack Scepter C18-120(3 μm,4.6.150 mm;P/N:227-31016-05);
純水機(jī):PR-FP-0120α-MT1(+ 60L水箱+ 取水器)
SHIMSEN Arc Disc HPTFE針式過濾器(P/N:380-00341-05);
LC-MS認(rèn)證樣品瓶LabTotal Vial(P/N:227-34001-01);
1.2 混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備
取ATP、ADP、AMP、煙酰胺、煙酰胺單核苷酸五種化合物適量,用流動(dòng)相稀釋制成各含100 μg/mL的樣品。
1.3 分析條件
色譜柱:Shim-pack Scepter C18-120(3 μm,4.6×150 mm;P/N:227-31016-05)
流 速:1.0 mL/min
進(jìn)樣量:5 μL
柱 溫:40 ℃
檢測器:PDA,254 nm
流動(dòng)相:A:10 mM四丁基氫氧化銨溶液于40 mM 磷酸二氫鉀溶液(調(diào)節(jié)pH至6.2)
B:甲醇
A:B=70:30
2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
按照上述色譜條件(1.3)進(jìn)行采集,混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液色譜圖如下:
混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液:
混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液重現(xiàn)性:
結(jié) 論
本文建立了煙酰胺、煙酰胺單核苷酸、AMP、ADP、ATP 5種化合物的HPLC測定方法。采用色譜柱Shim-pack Scepter C18-120進(jìn)行分析,5種化合物間分離度良好,峰形和重現(xiàn)性良好,滿足檢測需求。此方法可為煙酰胺、煙酰胺單核苷酸、AMP、ADP、ATP 5種化合物的分析提供參考。
Shim-pack Scepter C18-120
全多孔雜化硅膠色譜柱,
具有高惰性、高穩(wěn)定性和高柱效等特點(diǎn)。
耐受寬pH范圍(1-12),
并且具有高的耐受性,
展現(xiàn)出較廣泛的應(yīng)用范圍。
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)
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