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高純硅膠色譜柱的兩種在線結合及操作方法介紹

閱讀:860      發(fā)布時間:2021-5-24
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  高純硅因其優(yōu)良的機械強度和表面易改性等特征,已成為應用廣泛的色譜柱填料。高純硅膠色譜柱具有柱效高、選擇性好及分析速度快等特點,因而被廣泛用于分離極性小分子如藥物,而用于糖、肽或蛋白質分離較少。
  高純硅膠色譜柱的在線結合目前主要有兩種方式:
  一種是使用切換閥,將萃取柱和色譜分析柱連接,讓色譜流動相把萃取柱上富集的樣品全部轉移到色譜分析柱(直接方式)。
  另一種是間接方式,采用和離線固相萃取一樣的凈化方式。樣品組分收集后,用萃取儀內置的進樣器取10-20微升的組分注入色譜分析柱。
  二階在線固相萃取。它先采用間接方式的在線固相萃取作為一階段的樣品凈化,組分經過溶劑修飾后再通過直接在線固相萃取進行富集。這種二階在線固相萃取,先用一階去除大部分樣品的干擾物。所使用的萃取柱和普通的離線固相萃取一樣,可以是C18、離子交換、石墨化炭黑、親和色譜等類型。二階固相萃取的作用是富集和進一步凈化。因為樣品已經比較干凈,二階壽命得以延長。
  下面要為大家介紹的是高純硅膠色譜柱的操作方式:
  1、在條件允許情況下,在使用前對按照說明書方法進行柱效測試。以確保色譜柱的正常。
  2、所有硅膠基質色譜柱使用溫度應低于60℃。
  3、樣品
  將樣品溶解在流動相或極性相近的溶劑中。如果使用梯度洗脫,則需要將樣品溶解在初始流動相或極性相近的溶劑中。樣品溶液不應含有任何顆粒物,使用0.5μm或更小粒徑的濾膜過濾。樣品溶液如果使用強溶劑,為達到較好峰形,需要降低進樣量。
  4、流動相
  所有流動相,特別是含有緩沖鹽的流動相,當日實驗當日配制;如果使用了前日配制的流動相,請確保流動相pH值沒有變化,并確保流動相沒有長菌。流動相的pH值取決于您的應用和色譜柱填料類型。
  希望上述內容能夠幫助大家更好的了解本產品。

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