無需純化的病毒表征系統(tǒng)! 全自動病毒熒光檢測分析系統(tǒng)

時間：2022-5-9閱讀：1442

在基因治療域，慢病毒載體(Lentivirus)是種復制較慢的逆轉錄病毒，由HIV-1改造而來，常作為基因治療的載體使用。

慢病毒載體的制備流程需要對病毒的物理滴度和感染滴度進行檢測。

1. 現(xiàn)有的檢測手段（如p24 ELISA）因·病毒中p24蛋白的含量不同、含有p24蛋白的雜質(zhì)（如外泌體）等因素的影響，無法精準地表征病毒的物理滴度，且此類方法均無法對空載病毒（無p24蛋白）進行表征，這就給感染滴度的檢測帶來了誤差。

2. 在復雜的病毒工業(yè)化制備流程中，只測量末端純化產(chǎn)品的滴度，無法真實反映各個生產(chǎn)環(huán)節(jié)的生產(chǎn)效率，而對各個生產(chǎn)環(huán)節(jié)的樣品都進行純化表征會浪費大量人力物力。目前研究者亟需種無純化、快速、檢測下限低的病毒表征手段。

3. 目前的病毒表征手段，均無法將病毒的物理參數(shù)如粒徑(與載體聚合相關)與蛋白質(zhì)組分析聯(lián)系起來。因此，這些技術無法分析病毒滴度受樣品聚集或病毒破裂與分解影響的情況，因此無法區(qū)分單分散制劑與聚集樣品。

對于上述問題，美國NanoView公司所開發(fā)的全自動病毒熒光檢測分析系統(tǒng)是款無需純化的、全自動的可對病毒進行表征分析的全新設備。該設備能夠提供全·方位的病毒表征信息，包括病毒粒徑、病毒表面和內(nèi)部病毒蛋白、病毒物理滴度、空載比檢測、病毒轉導效率及假型定量表征等。操作簡單，結果可靠。

全自動病毒熒光檢測分析系統(tǒng)的基本原理是種基于異性免疫捕獲技術，允許研究者直接分析定群體的病毒。通過配套的試劑盒，客戶次性能夠分析多達16個不同的樣本，大大節(jié)省了時間和經(jīng)濟成本。

和傳統(tǒng)的病毒表征手段相比，全自動病毒熒光檢測分析系統(tǒng)有如下勢：

無需純化

NanoView的LentiView™技術可以對慢病毒進行檢測，將蛋白質(zhì)組信息與物理病毒滴度結合起來，無需樣品純化。只需 35 µl 未純化或純化的樣品，檢測濃度低至106VP/ml。無需擔心純化帶來的誤差，更精確地測量樣品間的表征和表達信息的差異。

慢病毒示意圖

全·方位的病毒粒徑分析

全自動外泌體熒光檢測分析系統(tǒng)能夠?qū)?gt;20 nm的病毒進行全方面的表征，無論是粒徑分布、空載病毒與完整病毒的假型分析均可在次測試中得到。并且所用來測試的樣本無需進行純化，避免因純化帶來的樣本偏差。

病毒滴度

病毒物理滴度的·常用檢測方法是p24 ELISA。該方法測量p24衣殼蛋白的濃度并將其轉化為病毒物理滴度。樣品中溶解的p24、不同病毒p24含量的不同以及病毒聚集會影響檢測準確性。此外， p24 ELISA無法檢測缺少衣殼(空載)的顆粒。LentiView™可對樣品中病毒進行高靈敏度的定量檢測，獲得滴度數(shù)據(jù)，區(qū)分完整和空載病毒并識別樣品中雜質(zhì)如可能經(jīng)過純化帶有的外泌體等。