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對于多細(xì)胞生物來說，細(xì)胞與細(xì)胞之間是存在差異的。受精卵從一個(gè)細(xì)胞開始分裂到最終發(fā)育成成熟的個(gè)體，各種功能細(xì)胞之間的差異會越來越大，表達(dá)各自不同的基因，決定不同的生理功能。疾病的發(fā)生過程中，伴隨多種細(xì)胞的參與，不同細(xì)胞也會受到不同影響，如腫瘤的異質(zhì)性、原發(fā)灶、轉(zhuǎn)移灶、腫瘤微環(huán)境細(xì)胞等其基因表達(dá)有很大的差異，這些差異決定了腫瘤細(xì)胞對治療的反應(yīng)。

傳統(tǒng)的研究方法由于技術(shù)限制，是在多細(xì)胞水平進(jìn)行的，獲得的基因表達(dá)信息是細(xì)胞群體的平均信號，丟失了細(xì)胞個(gè)體特異的基因表達(dá)信息。為了更加精細(xì)地研究基因表達(dá)于細(xì)胞功能的關(guān)系，單細(xì)胞水平進(jìn)行檢測是更加準(zhǔn)確的方法，獲得的基因表達(dá)信息也更加直觀。單細(xì)胞測序的發(fā)展將基因表達(dá)于細(xì)胞功能的研究帶入了一個(gè)新的時(shí)代。

在單細(xì)胞測序出現(xiàn)之前，主要是Bulk RNA-seq，即測量一個(gè)大的細(xì)胞群體中每一個(gè)基因的平均表達(dá)水平，但對于基因表達(dá)的本質(zhì)研究不夠深入，很多基因表達(dá)的時(shí)空信息被掩蓋。scRNA-seq直到2014年后才降測序費(fèi)用降低到可接受的水平，逐漸進(jìn)入大家的視野。它測定的是細(xì)胞種群中每個(gè)細(xì)胞中的基因的表達(dá)量分布，對于研究特定細(xì)胞基因表達(dá)的變化意義重大。能同時(shí)測定的細(xì)胞數(shù)量從最初的幾十上百個(gè)到現(xiàn)在的成千上萬個(gè)，向著高通量的方向快速發(fā)展。將研究推升到一個(gè)更加精準(zhǔn)的方向。

單細(xì)胞測序可以解決的科學(xué)問題
1.研究對象中細(xì)胞一共分多少群？
2.每個(gè)群對應(yīng)哪種細(xì)胞？
3.如何定義新的細(xì)胞類群？
4.已知的某類細(xì)胞是否可分成幾個(gè)亞群？
5.每個(gè)細(xì)胞群/亞群的marker基因？
6.不同樣本（病人）間的細(xì)胞構(gòu)成有何差異？
7.細(xì)胞構(gòu)成和基因表達(dá)差異與表型的關(guān)系？

樣本的要求
1. 總量> 10*目標(biāo)細(xì)胞個(gè)數(shù)（最少10,000個(gè)細(xì)胞）；
2. 濃度500-1,000個(gè)/uL；
3. 細(xì)胞間無粘連（成團(tuán)率<5%）；
4. 無大于40um的細(xì)胞碎片或其他顆粒物；
5. 細(xì)胞成活率應(yīng)大于80%（臺盼藍(lán)染色檢測）；
6. 不存在逆轉(zhuǎn)錄抑制劑和非細(xì)胞的核酸分子。

45-50個(gè)工作日

分析內(nèi)容

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