一、常用銀染方法?

1. ?高爾基染色法?

• 固定：新鮮腦組織用10%甲醛或混合液（重鉻酸鉀+甲醛）固定24小時以上
  。

• 鍍銀：3.5%重鉻酸鉀處理3-7天→AgNO?溶液避光浸染2-6天
  。

• 切片：火棉膠包埋后切20-100μm厚片，二甲苯透明封片
  。

• ?原理?：通過重鉻酸鉀和AgNO?反應沉積金屬銀，使神經元胞體、樹突（含樹突棘）及軸突呈黑色
  。

• ?步驟?：

2. ?Bielschowsky改良法?

• ?應用?：顯示神經纖維瘤、軸突等，陽性信號為深棕色/黑色
  。

• ?關鍵?：銀溶液浸染后需還原劑處理，避免非特異性沉積
  。

?二、實驗要點?

• ?質量控制?：

• 鍍銀時間需優(yōu)化，過短導致背景染色，過長致信號缺失
  。

• 分色步驟需顯微鏡下監(jiān)控，確保神經元與背景對比清晰
  。

• ?樣本處理?：

• 新鮮組織固定后需充分沖洗，避免殘留固定劑干擾銀染
  。

?三、結果判讀?

• ?陽性結構?：

• 高爾基法：神經元全形態(tài)（樹突棘、軸突分支）
  。

• Cajal銀染：神經原纖維網狀排列，突觸終扣呈環(huán)狀
  。

• ?常見問題?：

• 背景過深：需調整AgNO?濃度或縮短染色時間
  。

?四、應用場景?

• ?神經環(huán)路研究?：如小鼠后頂葉皮層神經元投射分析
  。

• ?病理診斷?：鑒別神經系統(tǒng)腫瘤（如神經纖維瘤）

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